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蛋白質含量中檢測方法的利與弊
點擊次數:194 發布時間:2021-12-10
  蛋白質分子中存在含有共軛雙鍵的酪氨酸和色氨酸,使蛋白質對280nm的光波具有吸收值,在一定的范圍內,蛋白質溶液的吸光值與其濃度成正比,可作定量測定。該法操作簡單、快捷,并且測定的樣品可以回收,低濃度鹽類不干擾測定結果,故在蛋白質和酶的生化制備中廣泛被采用。但此方法存在以下缺點:
 
  1.當待測的蛋白質中酪氨酸和色氨酸殘基含量差別較大會產生一定的誤差,故該法適用于測定與標準蛋白質氨基酸組成相似的樣品。
 
  2.若樣品中含有其他在280nm吸收的物質如核酸等化合物,就會出現較大的干擾。但核酸的吸收高峰在260nm,因此分別測定280nm和260nm兩處的光吸收值,通過計算可以適當的消除核酸對于測定蛋白質濃度的干擾作用。但因為不同的蛋白質和核酸的紫外吸收是不同的,雖經校正,測定結果還存在著一定的誤差。
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